Analyse du TB-500 : vérification de la pureté et de l'identité par HPLC

Vue d'ensemble des analyses du TB-500

Le TB-500 est une version synthétique du thymosin beta-4, un peptide de 43 acides aminés dont le poids moléculaire est de 4 963,44 Da (pour la séquence complète) ou d'environ 2 500 Da pour le fragment raccourci couramment vendu (LKKTETQ). Étant donné que le TB-500 est vendu sous plusieurs longueurs de fragment, il est essentiel de savoir quelle version vous testez et quel poids moléculaire attendre.

Analyse de pureté par HPLC

Le TB-500 est analysé par HPLC en phase inverse sur une colonne C18. Le seuil de pureté dépend du fragment :

• Thymosin beta-4 de pleine longueur : pureté ≥ 98 %, PM 4 963,44 Da
• Fragment TB-500 (LKKTETQ) : pureté ≥ 98 %, PM ~820 Da
• Fragment courant de 17 acides aminés : pureté ≥ 98 %, PM ~1 800 Da

Indiquez toujours quel fragment vous testez lorsque vous envoyez un échantillon au laboratoire.

Confirmation de l'identité par LC-MS

L'analyse LC-MS est essentielle pour le TB-500 car les différentes longueurs de fragment présentent des poids moléculaires très différents. Le spectre de masse révélera immédiatement si vous avez reçu le peptide de pleine longueur ou un fragment plus court. C'est l'un des problèmes les plus fréquents avec les produits à base de TB-500 — des vendeurs peuvent vendre un fragment court tout en l'étiquetant comme du thymosin beta-4 de pleine longueur.

Problèmes courants lors des tests du TB-500

• Substitution de fragment : un fragment court vendu comme peptide de pleine longueur. Le LC-MS révèle le poids moléculaire réel.
• Poids de remplissage insuffisant : le flacon contient moins de peptide qu'indiqué sur l'étiquette. La mesure du poids de remplissage permet de détecter ce problème.
• Agrégation : le TB-500 peut s'agréger en solution, ce qui provoque des pics HPLC élargis. Reconstituez une solution fraîche avant l'analyse.
• Contamination par le TFA : acide trifluoroacétique résiduel issu de la synthèse, qui peut affecter les essais biologiques.